ALMABION.RU        КАТАЛОГ           СЕРВИСЫ        ЗАКАЗ        О КОМПАНИИ        КОНТАКТЫ

ALMA-CleanUp: Набор для эстракции ДНК из агарозного геля и очистки из

реакционной смеси

 

                                                                                                                                                    
         Набор предназначен для быстрой и эффективной очистки фрагментов ДНК из агарозного геля, ферментативных смесей – ПЦР, рестрикции и т.д. Фрагменты ДНК избирательно сорбируются на фильтре спин-колонки, промываются этанол-содержащим буфером и элюируются низкосолевым буфером. На одной колонке возможна очистка до 25 микро-граммов ДНК.
 

Формат	Кат.  номер	Цена, руб.
50 выделений	B005	2 700
250 выделений	B006	11 500

                                                              

 

Применения:

 

·         Экстракция ДНК из ферментативных смесей

·         Выделение ДНК из агарозного геля

·         Очистка ДНК после ПЦР

 

 

Свойства:

 

·         Сорбция ДНК осуществляется на фильтрах спин-колонок

·         ДНК может быть использована для секвенирования, клонирования и в других ферментативных реакциях

·         Фрагменты ДНК от 100 до 10,000 пнт

·         Емкость колонок по ДНК до 25 микро-граммов

·         12 образцов за 15 минут

·         Объем элюирующего буфера 25-50 микро-литров

 

 

Руководство к пользованию:

     

        Набор предназначен для очистки ДНК размером до 15 Кб из агарозного геля и реакционных смесей (напр. ПЦР, реакции рестрикции и т.д.)

 

 

                                                                     Состав Набора: 

                                                       

Компонент:	B005	B006
Спин-колонки	50	250
2-мл пробирки для сбора элюата	50	250
1.5-мл пробирки без крышек для элюции ДНК	50	250
Буфер для сорбции ДНК	30 мл	150 мл
Раствор для промывки, концентрат	8 мл	48 мл
Буфер для элюции	5 мл	25 мл

 

Перед началом эксперимента:

·         Добавьте 50 мл этанола (96-100%) к 8 мл концентрата буфера для промывки.

·         TE буфер не рекомендуется для элюции ДНК

·         Для всех процедур подойдет настольная центрифуга любого типа (7,000-12,000 об/мин)

 

Протокол:

1а.    Для очистки ДНК из агарозного геля: Вырежьте гель содержащий ДНК и перенесите в 1.5-2.0 мл пробирку. Взвесьте гель и добавьте к нему равный объем Буфера для сорбции, например 100 мкл на 100 мг геля. Буфер должен быть в избытке если точная масса геля не известна.  Добавляйтете вдвое больше Буфера для сорбции если экстрагируете ДНК из агарозы  с концентрацией более 1.5%.
Инкубируйте на водяной бане (50-65 °C) периодически переворачивая пробирки в течение 5-10 мин или пока гель не растворится.
1б.  Для очистки ДНК из реакционной смеси (ПЦР или рестрикционный гидролиз): Добавьте равный объем Буфера для сорбции, перемешайте (вортекс или пипетируйте). Инкубируйте при комнатной температуре 1 мин.
2. Нанесите смесь на фильр спин-колонки и оставьте на 1-2 минуты для уравновешивания температур раствора и колонки.
3. Центрифугируйте в течение 1 мин.
4. Добавьте 500 мкл Раствора для промывки и центрифугируйте 15 секунд. Выбросьте элюат.
5. Повторите шаг 4.
6. Центрифугируйте еще 1 мин чтобы удалить остатки промывочного раствора.
7. Перенесите спин-колонку в пробирку для элюции ДНК. Добавьте 10-50 мкл Буфера для элюции в центральную часть мембраны спин-колонки и инкубируйте 2 мин. Центрифугируйте 1 мин. Перенесите ДНК в новую прибирку и храните при –20 °С.

Рис. Фрагменты ДНК различной длины вырезанные из агарозного геля и очищенные с помощью ALMA-CleanUp

                                                               Возможные проблемы: 

Низкий выход ДНК	Фрагменты ДНК меньше 0.1 кб и больше 10 кб выделяются с меньшим выходом
	Увеличить время инкубации с Буфером для элюции
	Подогреть спин-колонку и Буфер для элюции перед использованием при 50-60 °C
Гель растворяется с трудом	Добавьте больше Буфера для сорбции

АЛМАБИОН - РОССИЙСКИЙ ПРОИЗВОДИТЕЛЬ И ДИСТРИБЬЮТОР РЕАГЕНТОВ,
РАСХОДНЫХ МАТЕРИАЛОВ, СЕРВИСОВ ДЛЯ БИО-ИССЛЕДОВАНИЙ И ДИАГНОСТИКИ